可供选择的用于克隆的载体

OriGene所有的TrueClones构建在pCMV6克隆载体上，都可直接购买用做阴性对照。

emptypCMV6vector

有部分TrueClones构建在pCMV6-Entry载体上。插入cDNA片段包含终止密码子，因而C末端的标签将不被表达出来 。

pCMV6-Entry vector
Primer name Primer sequence (for sequencing)
VP1.5 (forward) 5' GGACTTTCCAAAATGTCG 3'
XL39 (reverse) 5' ATTAGGACAAGGCTGGTGGG 3'
查看引物在载体中的位置

此外，OriGene提供新霉素抗性的pCMV克隆载体，便于客户用我们的TrueClones建立稳定细胞系。

pCMV-Neo vector

载体序列信息下载:

pCMV6-XL4, XL5 & XL6载体主要功能特性：

  • 载体大小: 4.7kb
  • 大肠杆菌中的选择标记: 氨苄青霉素抗性
  • 哺乳动物细胞选择标记: 无。仅用于即时转染
  • 用于哺乳动物细胞中载体表达的启动子: CMV 启动子
  • 用于离体无细胞系统的启动子: 用于pCMV6-XL4 和pCMV6-XL5的T7及 用于pCMV6-XL6的SP6
  • 克隆位点: EcoRI 和 SalI。 在克隆形成后，EcoRI 位点依然完整, 但是SalI 的位点被破坏了
  • 用于移除插入片段的限制酶切位点: 用NotI。 *有两个NotI位点在载体中的克隆位点的两端
  • 适于转染的细胞株: COS, 293, Hela, CHO, NIH3T3, Mouse L cell,等
  • 转录终止及多腺苷酸化信号: 来自人生长激素基因(hGH)

VectorMap

为成功地进行高水平的转基因表达，我们开展了大量的针对构建载体的工作。用pCMV质粒与其它流行表达质粒pCDNA3.1 (Invitrogen)进行比较，具有高的或者类似的表达水平。

Comparison of pCMV to pCDNA3

Fig 1. pCMV6- 及 pCDNA3.1-质粒中的转基因表达水平比较。将CAT基因克隆在pCMV6及pCDNA3.1载体中的启动子的下游。在三个独立试验中，将同量的质粒DNA转染至COS1细胞，并且对CAT活性进行测定

参考文献:
Cloning, structure and expression of the mitochondrial cytochrome P-450 sterol 26-hydroxylase, a bile acid biosynthetic enzyme. J Biol Chem. 1989 May 15; 264(14): 8222-9. Andersson S, Davis DL, Dahlback H, Jornvall H, Russell DW.

Expression cloning and regulation of steroid 5 alpha-reductase, an enzyme essential for male sexual differentiation. J Biol Chem. 1989 Sep 25;264(27):16249-55. Andersson S, Bishop RW, Russell DW

载体相关资料