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OriGene shRNA in recent publications

HuSH-29TMshRNA 载体

所有的HuSH shRNA质粒都被克隆至pRS、pGFP-V-RS 或 pRFP-C-RS载体中,可用于瞬时转染和稳定转染,也可通过复制缺陷的逆转录病毒将shRNA表达盒稳定传送至宿主细胞。pGFP-V-RS 和 pRFP-C-RS载体提供了额外的turbo-GFP 和 turbo-RFP荧光蛋白表达,便于监测单个基因或双基因转染。(使用手册)

现有载体

Features pRS pGFP-V-RS pRFP-C-RS pGFP-C-shLenti
SKU TR20003 TR30007 TR30014 TR30023
Fluorescent Label N/A Green Red Green
Selection Marker in E.coli Ampicillin Kanamycin Chloramphenicol Chloramphenicol
Selection Marker for Mammalian Puromycin Puromycin Puromycin Puromycin
Transient or Stable Transfection Yes
Viral Packaging Yes Lentiviral
Download Sequence Download pRS Sequence Download Sequence Document Download Sequence Document Download Sequence Document
Download Datasheet pdf
Price / Amount / Availability ¥1615 / 5ug / In Stock ¥3705 / 5ug / In Stock
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可定制的载体

Features pB-RS pGFP-B-RS pRFP-CB-shLenti
SKU TR30024 TR30018 TR30032
Fluorescent Label N/A Green Red
Selection Marker in E.coli Ampicillin Kanamycin Chloramphenicol
Selection Marker for Mammalian Blasticidin Blasticidin Blasticidin
Transient or Stable Transfection Yes
Viral Packaging Yes Lentiviral
Download Sequence Download pB-RS Sequence Download Sequence Document Download Sequence Document
Download Datasheet
Price / Amount / Availability ¥1615 / 5ug / In Stock ¥3705 / 5ug / In Stock
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pGFP-C-shLenti载体:pGFP-C-shLenti载体属于第三代慢病毒载体,需利用其他带有病毒原件的辅助质粒来产生病毒颗粒。在pGFP-C-shLenti质粒载体的5’LTR 和3’LTR之间包含有三个主要的功能元件:U6启动子控制的shRNA表达框架,SV40启动子控制的嘌呤霉素抗性基因以及CMV启动子控制的tGFP基因。以上功能元件均在慢病毒包装的区域内,可包装到病毒颗粒中,包装好的慢病毒颗粒可用于感染多种细胞系。载体中用于细菌筛选的标记基因是氯霉素抗性基因。

pRFP CB shLenti
                                    (图一)
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pGFP-V-RS 载体:HuSH pGFP-V-RS质粒载体 (Figure 1) 包含带有侧翼嘌呤霉素筛选标记和U6-shRNA表达盒的莫洛尼小鼠白血病病毒(MMLV)5’ 端和 3’ 端长末端重复序列(LTR)。瞬时转染至包装细胞系后,获得复制缺陷病毒,可用于感染靶细胞。嘌呤霉素N端酰基转移酶基因和卡那霉素基因分别以嘌呤霉素和卡那霉素作为筛选抗生素。同时质粒整合 有由 CMV 启动子驱动turboGFP插件 ,易于验证转染效果。

shRNA表达盒包含一个29 碱基的靶基因特异性序列,一个7 个碱基的茎环和一个29 碱基的反向互补序列,所有的序列都位于U6启动子之后。终止序列(TTTTTT)位于第二个29 碱基 的反向互补序列的下游,通过RNA Pol III终止转录。基因特异性的shRNA经过序列验证,以确保与靶基因匹配。
pGFP-V-RS
                                    (图二)
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pRFP-C-RS 载体:HuSH pRFP-C-RS 质粒载体 (Figure 2) 整合有turboRFP插件,易于验证转染效果。该载体同时拥有氯霉素和嘌呤霉素抗性基因 ,便于筛选。pRFP-C-RS质粒便于配合pGFP-V-RS表达质粒进行双基因抑制式样的监测。 pRFP-C-RS
                                      (图三)
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pRS vector:HuSH pRS质粒载体 (Figure 3) 不含荧光标记,使用氨苄进行原核筛选,嘌呤霉素进行真核细胞筛选。其他元件与以上两种载体相同 。 pRSRNAvector5430bp
                                       (图四)
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pGFP-B-RS 载体:HuSH pGFP-B-RS 质粒载体 (Figure 4) 提供与 pGFP-V-RS 载体相同的元素,但带有一个不同的哺乳 动物细胞筛选标记,用稻瘟素(blasticidin) 筛选标记代替嘌呤霉素,该筛选标记存在于我们所有的逆转录病毒载体中,有助于研究者在双基因抑制试验中建立稳定细胞株。请见双基因抑制试验建立稳定细胞株 获取更多信息.. pGFP-B-RS
                                         (图五)
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pB-RS 载体:HuSH pB-RS 质粒载体(图5)提供与pRS载体相同的元素。但带有一个不同的哺乳 动物细胞筛选标记,用稻瘟素(blasticidin)筛选标记代替嘌呤霉素。 pB-RS vector
                                         (图六)
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pRFP-CB-shLenti载体:pRFP-CB-shLenti 载体属于第三代慢病毒载体,需利用其他带有病毒原件的辅助质粒来产生病毒颗粒。在pRFP-CB-shLenti质粒载体的5’LTR 和3’LTR之间包含有三个主要的功能元件:U6启动子控制的shRNA表达框架,SV40启动子控制的杀稻瘟菌素抗性基因以及CMV启动子控制的tRFP基因。以上功能元件均在慢病毒包装的区域内,可包装到病毒颗粒中,包装好的慢病毒颗粒可用于感染多种细胞系。载体中用于细菌筛选的标记基因是氯霉素抗性基因。 pRFP-CB-shLenti
                                         (图七)

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其他对照载体有现货可以单独购买。

 

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